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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網(wǎng)絡(luò)整理
水牛的精液采取冷凍顆粒長(zhǎng)期保存，是一種先進(jìn)技術(shù)，它能夠充分發(fā)揮優(yōu)良種畜的性能優(yōu)勢(shì)，使其不受壽命、地點(diǎn)的限制，一頭優(yōu)良公牛一年可供5000頭母牛配種用精，比本交提高上百倍。
1水牛冷凍顆粒精液理論根據(jù)
精子是具有生命活力的性細(xì)胞，結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，精子在－0.6℃以下至－30℃時(shí)，細(xì)胞間隙的水分結(jié)成冰晶，使細(xì)胞脫水，原生質(zhì)變干，造成精子死亡。另外，大的冰結(jié)晶對(duì)精子造成機(jī)械損傷，使原生質(zhì)的表層破壞失去保護(hù)作用，冰晶滲入精子內(nèi)部，破壞精子的結(jié)構(gòu)，使精子不能復(fù)蘇。但是，水的結(jié)晶只能在一定溫度范圍內(nèi)才能形成，如果低于該溫度范圍就形成玻璃化體，按照玻璃化學(xué)說，原生質(zhì)發(fā)生玻璃化對(duì)細(xì)胞影響較小，如果快速升溫，玻璃化可越過結(jié)晶態(tài)而直接變?yōu)橐簯B(tài)，不致于損害精子細(xì)胞的結(jié)構(gòu)而使精子死亡。
根據(jù)上述原理，在水牛的顆粒精液冷凍的制作過程中，快速越過冰晶危險(xiǎn)區(qū)的溫度（－60℃至－40℃），才能使冷凍精液取得好的效果。
2水牛冷凍顆粒精液的制作
2.1采精方法用假陰道采精法，將黃牛用的假陰道截短，由50cm截至35cm，內(nèi)胎由67cm截至46cm，改集精杯為膠漏斗接上10～15ml茶色刻度離心管。優(yōu)點(diǎn)：A、操作方便，減少精子和假陰道的接觸，使精子少受外界不利因素的影響;B、收集精液快;C、可直接看出射精量。
2.2采精頻率采精頻繁，每次的射精量和濃度降低;采精次數(shù)過少，采得的精液衰老精子多，不能利用，以每月采精10～13次比較合理。
2.3精液的品質(zhì)檢查檢查要迅速，要求精液濃度在每毫升含精子10億以上，活力在0.7級(jí)以上，精子畸形率不得超出15%。
2.4稀釋稀釋液要有營(yíng)養(yǎng)，抗菌、抗冷和適當(dāng)?shù)膒H值（6.4～6.8），相等的滲透壓。1號(hào)液：12%蔗糖77ml，甘油3ml，蛋黃20ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位;2號(hào)液：14%乳糖75ml，甘油5ml，蛋黃20ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位。稀釋倍數(shù)按照稀釋后每毫升含有精子3～4億為原則。
2.5平衡精液衡釋后，進(jìn)行鏡檢，如和衡釋前相比無變化，可將盛精液瓶用棉塞封口，再用4～8層紗布包好，放在裝有冰塊的廣口保溫瓶中平衡3～4小時(shí)，使精子有一段適應(yīng)低溫的時(shí)間，并使保護(hù)劑甘油滲入精細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生抗凍作用。
2.6顆粒制作
2.6.1滴凍前鏡檢：經(jīng)過平衡的精液，在滴凍前要進(jìn)行一次鏡檢，如精子活力和平衡前差異大而又達(dá)不到0.6級(jí)以上不進(jìn)行滴凍。
2.6.2制粒方法：將盛有7成滿液氮的廣口保溫瓶放好，在液氮面上放一鋁盒，將鋁盒蓋翻蓋在鋁盒上，再接上量溫感應(yīng)器，直測(cè)盒蓋的溫度，當(dāng)溫度達(dá)到－90℃至－130℃，方可滴凍。將經(jīng)過平衡和鏡檢達(dá)到滴凍標(biāo)準(zhǔn)的存放精液廣口保溫瓶放在方便操作處，不要取出精液瓶，防止升溫，用預(yù)冷好的滴管吸取精液，每滴0.1ml，快速滴凍，然后進(jìn)行1～2分鐘熏蒸、脫粒、浸入液氮。再進(jìn)行解凍鏡檢，如活力在0.3級(jí)以上，收入液氮中保存。繼續(xù)進(jìn)行滴凍，要求滴凍速度快，手壓滴管的膠球用力要均勻，逐步向內(nèi)壓，不得放松。否則，進(jìn)入空氣，出現(xiàn)氣泡。
2.6.3收粒保存：凍完后收入液氮罐小提筒中可做長(zhǎng)期保存，在收存中要注意顆粒暴露在空氣中時(shí)間不能長(zhǎng)。經(jīng)過試驗(yàn)，用塑料瓶存放顆粒比提筒好，可從小瓶上方鉆孔進(jìn)入液氮，取用方便，又可保持顆粒不暴露在空氣中。
2.7解凍
2.7.11號(hào)解凍液：檸檬酸鈉2.9g，蒸餾水100ml;2號(hào)解凍液：檸檬酸鈉1.7g，蔗糖1.15g，碳酸氫鈉0.09g，氨苯磺胺0.3g，磷酸二氫鉀0.325g，蒸餾水100ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位。以上兩種解凍液，2號(hào)解凍液解凍后保存時(shí)間較長(zhǎng)，可以運(yùn)到站點(diǎn)輸精，1號(hào)解凍液可用于隨時(shí)解凍隨時(shí)使用。
2.7.2解凍溫度：取1毫升解凍液，注入經(jīng)過消毒的青霉素小瓶?jī)?nèi)，放在45℃水中預(yù)熱，當(dāng)瓶?jī)?nèi)溫度達(dá)到40℃～45℃時(shí)，放入一粒冷凍顆粒，不斷搖動(dòng)使之融化。鏡檢精子活力，如達(dá)到0.3級(jí)以上便可輸精。
2.8顆粒冷凍精液的運(yùn)輸冷凍顆粒用10立升的液氮缺罐運(yùn)輸，在提取時(shí)要填好標(biāo)簽，注明品種、牛耳號(hào)、冷凍時(shí)間等，運(yùn)輸過程中不能振動(dòng)、碰擊，要存放牢固、通風(fēng)、防烈日照曬。
3水牛冷凍精液的應(yīng)用
3.1適時(shí)輸精信陽水牛一年四季都發(fā)情，但有明顯的淡旺季之分，一般3～8月份發(fā)情較多，其他月份較少。配種年齡一般控制在2.5歲。發(fā)情周期平均為25天。每次發(fā)情持續(xù)時(shí)間為1.5～3天。一般在發(fā)情45小時(shí)后開始輸精，此時(shí)母牛性欲已消失，子宮頸充血腫脹已減退，子宮頸口待關(guān)閉，黏液量減少，實(shí)踐證明在此時(shí)輸精受胎率高。
3.2輸精方法我場(chǎng)多采取直腸把握子宮頸輸精法，此法簡(jiǎn)便、易于操作，精液可直接輸?shù)阶訉m深部，使精液不易倒流，通過直腸觸摸不會(huì)因誤配引起流產(chǎn)，用此種方法輸精受胎率高。
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