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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間:2018-03-14 作者:佚名 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)整理
本試驗(yàn)抓住仔豬出生、斷奶、轉(zhuǎn)群等幾個(gè)關(guān)鍵時(shí)期應(yīng)用復(fù)合生物菌的情況,研究其對(duì)仔豬腸道正常菌群、防治腸道疾病、對(duì)致病性大腸桿菌拮抗作用等的影響。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
1.1.1試驗(yàn)用制劑
復(fù)合生物菌:由公主嶺生物研究所提供。
治菌磺:由吉林省華牧動(dòng)物保健品公司提供。
鹽酸金霉素:由福州抗生素廠生產(chǎn),20萬(wàn)/g。
1.1.2試驗(yàn)動(dòng)物
本次試驗(yàn)挑選8頭英白母豬,生產(chǎn)性能基本相似,分娩日期相同或接近,經(jīng)產(chǎn)胎次為2~4胎,窩產(chǎn)仔數(shù)在10~12頭之間。母豬分娩后,按每窩實(shí)產(chǎn)仔豬數(shù)分為2組,窩間不混群,初生體重基本相同。
1.2飼養(yǎng)管理
飼養(yǎng)程序和防疫程序均按常規(guī)進(jìn)行,仔豬28d斷奶。
1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.3.1試驗(yàn)分組
試驗(yàn)分成試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組仔豬從出生后吃第1次初乳前,灌服復(fù)合生物液菌2mL,每日1次,至7日齡。1周后,用復(fù)合生物菌粒菌3%混入飼料中飼喂,至60日齡。對(duì)照組從補(bǔ)料開(kāi)始在飼料中添加0.04%鹽酸金霉素,至60日齡。
1.3.2攻毒試驗(yàn)
于仔豬10日齡時(shí)分別從試驗(yàn)組和對(duì)照組選取5頭仔豬,分別灌服30mL致病性大腸桿菌,觀察仔豬糞便的變化及臨床反應(yīng),并測(cè)定腸道菌群的變化,同與添加鹽酸金霉素但未攻毒的對(duì)照組進(jìn)行比較。
1.4試驗(yàn)測(cè)試程序
1.4.1仔豬糞便情況記錄
從仔豬出生后開(kāi)始全面記錄各窩仔豬的健康及下痢情況,主要有下痢仔豬的豬號(hào)、窩號(hào)、第一次下痢時(shí)間、處置方法、治愈情況、死亡數(shù)量及診斷結(jié)果。試驗(yàn)期間,凡試驗(yàn)組仔豬出現(xiàn)下痢,一律用復(fù)合生物菌按每日每次5mL劑量治療,對(duì)照組仔豬發(fā)病完全用治菌磺治療,劑量為0.2~0.3mL/kg,隔日一次,不混用。死亡剖檢診斷:對(duì)應(yīng)用復(fù)合生物菌和抗生素治療無(wú)效而非其他原因?qū)е滤劳龅淖胸i,進(jìn)行尸體剖檢,并由獸醫(yī)作出診斷。
1.4.2腸道菌群測(cè)定
以無(wú)菌操作采取直腸內(nèi)10cm處糞便樣品,即用滅菌好的帶有塞子的玻璃管將棉拭送入直腸內(nèi)10cm處,以棉拭將管塞頂?shù),然后取糞樣或內(nèi)容物,再將棉拭撤回管內(nèi),一同取出。取出后放入盛有CO2的無(wú)菌試管內(nèi),迅速帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的分離培養(yǎng)。采樣時(shí)間為2h,6h,12h及1d,2d,4d,7d,14d,28d,60d。在無(wú)菌室內(nèi)采取樣品0.1g,以滅菌的稀釋液將樣品稀釋成10-2,10-3,10-4,10-5,10-6,10-7,用滅菌的滴管從高倍稀釋液開(kāi)始分別取液一滴(0.01mL/滴),滴入各選擇培養(yǎng)基中,用曲玻棒推勻,每個(gè)稀釋度做3個(gè)重復(fù),取其平均值。大腸桿菌為需氧和兼性厭氧菌,在37℃條件下培養(yǎng)24h;其它2種菌為厭氧菌,采用李伏夫氏法培養(yǎng)。
1.4.3抗病力測(cè)定
仔豬下痢致病性大腸桿菌:從豬場(chǎng)患病的仔豬糞便中分離出致病性大腸桿菌,采用普通肉湯培養(yǎng)基增菌,為10~12億個(gè)/mL。于仔豬10日齡時(shí)分別從試驗(yàn)組和對(duì)照組各選5頭體重基本相同的健康仔豬,每頭灌服大腸桿菌肉湯培養(yǎng)物30mL,觀察仔豬糞便的變化及其它臨床反應(yīng),同時(shí)對(duì)直腸內(nèi)大腸桿菌和雙歧桿菌進(jìn)行測(cè)定。
2試驗(yàn)結(jié)果與分析
3討論
3.1對(duì)仔豬腸道菌群的影響
本試驗(yàn)仔豬一出生就開(kāi)始口服復(fù)合生物菌,并跟蹤檢測(cè)直腸的主要正常菌群數(shù),直腸內(nèi)主要菌群大腸桿菌低于對(duì)照組,雙歧桿菌和乳酸桿菌高于對(duì)照組。而且,在仔豬出生3日齡后雙歧桿菌和乳酸桿菌始終占優(yōu)勢(shì)。復(fù)合生物菌促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸桿菌在腸道內(nèi)的繁殖,并有效抑制大腸桿菌的繁殖,對(duì)于仔豬腸道正常菌群的形成是非常有意義的,這與Gedek(1987),張國(guó)龍(1994)的研究結(jié)果是一致的。但直腸正常菌群沒(méi)有表現(xiàn)出提前定植的趨勢(shì),因?yàn)檎G闆r下,仔豬出生后6h就可以在腸道內(nèi)檢測(cè)到大腸桿菌、乳酸桿菌等。出生后24h主要正常菌群都可在直腸內(nèi)檢出。
3.2對(duì)腸道疾病的防治效果
本試驗(yàn)針對(duì)仔豬的常見(jiàn)病下痢(黃、白痢)應(yīng)用復(fù)合生物菌制劑來(lái)替代抗生素類(lèi)藥物,取得了肯定的結(jié)果。對(duì)試驗(yàn)期仔豬的記錄結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析表明,在仔豬出生后的0~15日齡發(fā)病率高,在斷奶后一周內(nèi)下痢、腹瀉也時(shí)有發(fā)生。使用復(fù)合生物菌防治仔豬黃、白痢取得了明顯的療效,且優(yōu)于抗生素組。尤其是初生后立即灌服復(fù)合菌預(yù)防仔豬黃痢效果顯著。
3.3對(duì)致病性大腸桿菌的拮抗作用
在攻毒試驗(yàn)中,試驗(yàn)組表現(xiàn)出比對(duì)照組有明顯的抵抗力,給予致病性大腸桿菌后,對(duì)照組攻毒的5頭仔豬均表現(xiàn)出明顯的腹瀉癥狀,而試驗(yàn)組卻沒(méi)有表現(xiàn)出腹瀉癥狀。這種外在的表現(xiàn)與腸道中微生態(tài)菌群的變化是一致的,試驗(yàn)組攻毒后,正常菌群基本變化不大。但對(duì)照組攻毒后大腸桿菌數(shù)明顯高于試驗(yàn)組,雙歧桿菌則明顯低于未攻毒的而又未服復(fù)合生物菌的對(duì)照組。
因此,復(fù)合生物菌本身對(duì)致病性大腸桿菌有拮抗作用,以至于致病性大腸桿菌表現(xiàn)不出致病作用。因此,復(fù)合生物菌有助于仔豬正常菌群的定植和優(yōu)勢(shì)菌地位的鞏固,對(duì)仔豬腸道性疫病有明顯的抵抗作用。
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