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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間:2018-03-15 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
三、傳染病診斷
家兔傳染病是兔病中最重要而給養(yǎng)兔業(yè)帶來損失最大的疫病,必須盡可能早期診斷,為預(yù)防治療提供依據(jù),在非疫區(qū)作好預(yù)防為主的工作,在疫區(qū)做到“早、快、嚴(yán)、小”盡可能減少家兔死亡,降低損失,達(dá)到消滅傳染病的目的。
為了正確診斷,必須采取各種檢查疫病的方法,如流行病學(xué)、臨床、微生物學(xué)及免疫學(xué)等診斷方法,也可根據(jù)傳染病不同特點(diǎn),采用上述某些方法或綜合應(yīng)用各種方法。
流行病學(xué)診斷:通過訪問、調(diào)查,搜集有關(guān)資料進(jìn)行分析研究,幫助傳染病的確診,可從以下幾方面進(jìn)行:
1?發(fā)病家兔地區(qū)有哪些傳染病,最早發(fā)病時(shí)間、地點(diǎn)、季節(jié),傳播速度及蔓延情況,發(fā)病兔年齡、性別,品種及其感染率、發(fā)病率和死亡率。
2?應(yīng)從家兔飼養(yǎng)管理,飼料配方調(diào)制方法及衛(wèi)生條件及臨近地區(qū)無有疫情發(fā)生。
3?傳染病發(fā)生經(jīng)過、發(fā)病前預(yù)防注射過哪些疫(菌)苗以及發(fā)病后治療情況。
臨床癥狀,剖解所見的病理變化及經(jīng)過治療的效果。
發(fā)病區(qū)域的地形、氣候、昆蟲及野生動物等與疫病發(fā)生的關(guān)系。
臨床診斷:是診斷疫病的最基本方法,通過對疫病發(fā)生的了解,實(shí)地觀察及對病、死兔剖檢和測溫等方法進(jìn)行一般檢查,另外要對疫病進(jìn)行類癥鑒別及療效驗(yàn)證均十分重要。
病理解剖學(xué)診斷:每一種傳染病均會有其特殊病痕,很多疾病通過尸體剖解可以了解體內(nèi)各種器官的病理形態(tài)學(xué)的變化,如兔病毒性出血癥(兔瘟)有肺出血等變化,巴氏桿菌病也有肺出血,所以要進(jìn)行區(qū)別診斷。
微生物學(xué)診斷:這是查清病原體的重要手段。
1?細(xì)菌性疾病采取有病變的內(nèi)臟器官,如心臟、肝、脾、腎、空腸、回腸、淋巴結(jié)等作為被檢病料。
染色與鏡檢:取清潔玻片作被檢病料的觸片或涂片,自然干燥后,火焰固定,用革蘭氏、美藍(lán)或姬姆薩染液染色,待干后鏡檢。由于不同致病菌染色結(jié)果不一樣,如A型魏氏梭菌呈革蘭氏陽性大桿菌,較少能看到芽胞;巴氏桿菌呈革蘭氏陰性菌,大小一致的卵圓形小桿菌。
分離培養(yǎng):用不同的培養(yǎng)基如綿羊鮮血瓊脂、血清瓊脂等培養(yǎng)基,于37℃溫箱培養(yǎng)20-24小時(shí),再取其典型菌落接種馬丁肉湯培養(yǎng)基,培養(yǎng)20-24小時(shí),再作涂片檢查及測生化反應(yīng),動物接種和血清學(xué)檢驗(yàn)等。
動物接種:可以取被子檢兔的臟器磨細(xì)用滅菌生理鹽水作1:5或1:10稀釋,也可以用分離培養(yǎng)菌落接種的馬丁肉湯作為接種材料。一般以皮下、肌肉、腹腔、靜脈或滴鼻接種家兔或小白鼠,劑量:兔0.5毫升為宜,小白鼠0.2毫升即可。若接種后兔或小白鼠發(fā)病或死亡,有典型的病理變化即可確診。
血清學(xué)檢驗(yàn):其目的在于應(yīng)用血清學(xué)方法對兔群進(jìn)行普查診斷。方法有試管法和玻片法。試管法:將待檢血清作成不同稀釋度,分別加入等量診斷抗原,搖勻后放置于37℃溫箱或室溫2-3小時(shí)觀察,凝集價(jià)在1:40以上者為陽性反應(yīng)。玻片法:取被鹼血清0.1毫升加于玻片上,同時(shí)加入等量診斷抗原,于15-20℃下?lián)u動玻片使抗原與被檢血清均勻混合,1-3分鐘內(nèi)觀察絮狀物,液體透明者為陽性。
2?病毒性疾病由于各種病毒在不同組織中含毒量不同,所以必須要采取含病毒量最多的組織,并要求新鮮,如兔病毒性出血癥含毒量最多者是肝組織,水皰性口炎應(yīng)采水皰液、水皰皮為被檢材料。
病毒的分離培養(yǎng):用被檢材料接種于新鮮瓊脂培養(yǎng)基或血清血紅素培養(yǎng)基,結(jié)果均為陰性者則將被檢材料磨細(xì)或?qū)⒁后w材料用無菌生理鹽水(PH7.2左右)、磷酸鹽緩沖液作1:10稀釋用6號玻璃濾器過濾的濾液即可作為接種材料,同時(shí)在接種液中加入青、鏈霉素(每毫升1000單位)。
接種:根據(jù)接種材料可以分為下面三種方式:
雞胚接種:取9-10日齡的雞胚,每胚絨尿腔接種0.2毫升,一般在接種后48-72小時(shí)內(nèi)死亡。
組織細(xì)胞接種:用各種動物組織的原代細(xì)胞或傳代細(xì)胞接種,病毒能在細(xì)胞上繁殖,同時(shí)能使細(xì)胞產(chǎn)生病變。
動物接種:通常用小白鼠、豚鼠和家兔接種病料。有的接種家兔一般皮下、肌肉或腹腔注射0.5毫升,有的用豚鼠皮內(nèi)接種,如水皰性口炎。
(3)病毒的鑒定:分離得到的病毒材料要以電子顯微鏡檢查、血清學(xué)試驗(yàn)即可確認(rèn),進(jìn)一步還需做理化和生物學(xué)特性鑒定。
(4)血清中和試驗(yàn):在被檢病料上清液中加入等量該病標(biāo)準(zhǔn)高免血清,混勻后于37℃溫箱作用30分鐘;對照組用生理鹽水代替血清。兩組材料分別接種易感動物,一般觀察7天。如果血清組獲保護(hù),而對照組發(fā)病死亡即可確診。
(5)兔疫學(xué)診斷:是一種重要的診斷技術(shù),這些方法具有靈敏、快速、簡易、準(zhǔn)確的特點(diǎn),用于傳染病的診斷,大大地提高了診斷水平,至今應(yīng)用已十分廣泛。
在動物傳染病的免疫學(xué)檢驗(yàn)中,除凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng);中和反應(yīng)等血清學(xué)檢驗(yàn)方法外,先后又研究出兔疫擴(kuò)散、變態(tài)反應(yīng)、螢光抗體技術(shù)、酶標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)等屬于免疫學(xué)診斷的范疇。
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